יחיד-גֵן ניתוח הוא שיטת בדיקה גנטית ממוקדת.
במסגרת הליך זה, אם יש חשד למחלה תורשתית, המופעלת על ידי שינוי יחיד ב- גֵן, הגן החשוד כסיבתי נבדק. זה נעשה לעתים קרובות באופן שגרתי כחלק מבדיקות המיון.
אינדיקציות (תחומי יישום)
- אבחון של מחלות מונוגניות למשל סיסטיק פיברוזיס.
התהליך
חומר נחוץ
- דם הפרין (מינימום 1-2 מ"ל)
הכנת המטופל
- לא נחוץ
גורמים משבשים
- לא ידוע
שיטת המעבדה
לרוב, שיטת הרצף המשמשת ב-גֵן ניתוח היא שיטת סאנגר, המכונה גם סינתזת סיום שרשרת, שם היא באה לראשונה לבידוד ה- DNA מה- דם. ואז, הכל הידרוגנציה קשרים המשמשים להחזקת הדנ"א הדו-גדילי נשברים. לאחר חימום בטמפרטורה של 94-96 מעלות למשך דקה, קיימים שני קווצות בודדות. לאחר מכן, מה שמכונה הכלאה של פריימר מתרחשת, לפיה מחובר פריימר. זה מתרחש בכ 60 מעלות צלזיוס. פריימר הוא אוליגונוקליאוטיד (אוליגומרים המורכבים מכמה נוקלאוטידים) המשמש כנקודת מוצא לשכפול DNA אנזימים כגון פולימראז DNA. לאחר הכלאת פריימר, מתרחשת הארכה, בה הטמפרטורה מוגברת ל 72 מעלות צלזיוס. זה מאפשר לפריימר להתחבר לפולימראז ה- DNA (אנזימים המסנתז DNA). לאחר ממוצע של 30 מחזורים ניתן לעצור את ההליך.
ניתוח נוסף מבוצע על ידי נימים אלקטרופורזה ברצפים אוטומטיים. התוצאה נקראת אלקטרופרוגרמה. זה מראה צבעים שונים המציינים את רצף הבסיס.
בשיטה זו ניתן לאתר מוטציות הכוללות בסיס גרעין יחיד בתוך גן, המכונה גם מוטציות נקודתיות.
