פלואורסצנטי בהכלאה סיטואלית

פלואורסצנציה הכלאה באתרו (FISH) היא שיטת סינון גנטית לזיהוי DNA (חומצה דאוקסיריבונוקלאית) בגרעינים של תאים בודדים.

שיטה זו כוללת שימוש בבדיקות דנ"א ספציפיות שיכולות לספק מידע רק על אזורים גנומיים שעבורם החללית משמשת.

אינדיקציות (תחומי יישום)

  • חשד לסטייה כרומוזומלית מספרית:
    • איתור מומים כרומוזומליים מספריים (למשל טריזומיה 21).
    • לכימות פסיפסים לסטיות כרומוזומליות (למשל, באולריך -תסמונת טרנר).
  • איתור עבור מחיקות מיקרו (למשל, מונוזומיה 22q11.2).
  • איתור סטיות כרומוזומליות (למשל, לוקמיה לימפוציטית כרונית (CLL), לא הודג'קין לימפומה).

האינדיקציות לעיל מנותחות על ידי FISH הבין-שלבי (לפרטים ראה "נוהל המעבדה").

התהליך

חומר נדרש

  • דם הפרין (מינימום 1-2 מ"ל)

הכנת המטופל

  • לא נחוץ

גורמים משבשים

  • לא ידוע

שיטת המעבדה

קרינה פלואורסצנטית הכלאה באתרו (FISH) כוללת שימוש בחדשי DNA שכותרתו פלואורסצנטית (בדיקות FISH). אלה יכולים להיקשר לאתר DNA ספציפי בכרומוזום, הנקרא הכלאה. לאחר או לאחר כריכה של החללית שכותרתה פלואורסצנטית, ניתן לבצע הערכה באמצעות מיקרוסקופ. בתהליך זה נקבע מספר אותות הקרינה בתוך הגרעינים הבין-פאזיים. יתר על כן, הערכה של המיקום (למשל טרנסלוקציה / מעבר של מיקום / לכרומוזום אחר) במטאפאזה הכרומוזומים זה אפשרי.

כאשר פלורסנט שונה צבעים משמשים לדנ"א יעדים שונים בהליך FISH, הוא מכונה FISH צבעוני. זה מאפשר הדמיה מוחלטת של הגנום.

במקרים מסוימים, בדיקת ה- DNA אינה מתויגת ישירות עם צבע פלואורסצנטי, מה שמכונה הליך עקיף. במקום זאת, הוא מתויג עם חומרים כגון ביוטין או digoxigenin. שיטה זו נחשבת מסובכת יותר אך רגישה יותר.