הכלאה באתרו היא שיטה לאיתור סטיות כרומוזומליות. זה כולל תיוג ספציפי הכרומוזומים עם קמח צבעים וקשירתם לבדיקת DNA. טכניקה זו משמשת לאבחון טרום לידתי של מוטציות גנטיות.
מהי הכלאה באתרו?
הכלאה באתרו כוללת תיוג ספציפי הכרומוזומים עם קמח צבעים וקשירתם לבדיקת DNA. טכניקה זו משמשת לאבחון טרום לידתי גֵן מוטציות. הכלאה באתרו או פלואורסצנטי הכלאה באתרו כרוך בזיהוי גנטי מולקולרי של חומצות גרעין מ- RNA או DNA ברקמות ספציפיות או בתא. בדרך כלל, סוג זה של אבחון משמש לאיתור חריגה כרומוזומלית מבנית או מספרית הֵרָיוֹן. לשם כך משתמשים בחלונית המיוצרת באופן מלאכותי, אשר עצמו מורכב מחומצת גרעין. ואז הוא נקשר ל חומצות גרעין באורגניזם על ידי זיווג בסיס. כריכה זו מכונה על ידי המונח הכלאה. הזיהוי מתבצע על מבנה החיים של המטופל ולכן תואם לגילוי באתר. יש להבדיל מכך שיטות חוץ גופיות, בהן הזיהוי מתרחש במבחנה. השיטה פותחה במאה ה -20 על ידי המדענים ג'ו גל ומרי לו פרדו. הטכניקה התפתחה מאז. לדוגמה, בעוד ששימשו אז בדיקות רדיואקטיביות, בדיקות עם תווית קמח עם קשר קוולנטי לתווית. מולקולות משמשים היום.
פונקציה, אפקט ומטרות
הכלאה באתרו משמשת בדרך כלל לזיהוי סטיות כרומוזומליות, הפרעות כרומוזומליות שלא ניתן לגלות בקריוגרמה. לפיכך, השיטה משמשת תמיד כאשר יש לקבוע מחלות תורשתיות במהלך הֵרָיוֹן. מאחר שסטיות כרומוזומליות הן בעיה שאין לזלזל בה כיום, יישום השיטה גדל עם הזמן. הכלאה מתבצעת באמצעות תאים מקומיים של האם מי שפיר. הבסיס לטכניקה הוא קשירת החללית שכותרתה בצבע לשברי DNA. הודות לכריכה, מאוחר יותר ניתן להשתמש במיקרוסקופ כדי להעריך את מספר העותקים, שכן העותקים הבודדים פולטים אות אור ובכך ניתן להראות אותם במיקרוסקופ. ישנם נהלים שונים לכך. או שהניתוח מתרחש מיד לאחר הכריכה. במקרה זה, צבע קמח כמו ביוטין משמש, אשר נקשר ישירות לבדיקת ה- DNA. בשיטה העקיפה של הכלאה באתרו, לא ניתן לבצע את הניתוח מיד לאחר הכלאה מכיוון שחומרים פלואורסצנטיים יכולים להיקשר לחללית רק לאחר הכלאה. שיטה עקיפה זו נפוצה יותר מהשיטה הישירה מכיוון שהיא נחשבת רגישה יותר. הטכניקות כוללות בדיקות DNA צנטרומטר ספציפיות לכרומוזום, בדיקות DNA ספציפיות למיקום, בדיקות ספריית DNA ספציפיות לכרומוזום והכלאות גנום השוואתיות. בעזרת בדיקות DNA צנטרומריות ספציפיות לכרומוזום ניתן לזהות הפרעות מספריות כרומוזומליות. כלומר, הם משמשים בעיקר כאשר הם משוכפלים או נמחקים הכרומוזומים חשודים. בדיקות ה- DNA הספציפיות למוקד מתאימות בעיקר לזיהוי מוטציות מינימליות שלא ניתן לזהות בקריוגרמה. בדיקת ספריית DNA ספציפית לכרומוזום משמשת במיוחד לאיתור הכנסות ותעתיקים. לעומת זאת, הכלאה של גנום השוואתי היא ניתוח מקיף של הפסדים ורווחים בחומר כרומוזומלי. כיום, לכלאה באתרו יש חשיבות רבה באבחון של מוטציות כרומוזומליות שונות. באבחון של תסמונת דאון, למשל, בדיקות נקשרות לכרומוזום 21. לשם כך משתמשים בדרך כלל בגששים ספציפיים לכרומוזום, שניתן ליישם במקרים של חשד למחלה זו. חשד עשוי להתעורר, למשל, אם ההורים ילדו בעבר ילד חולה במחלה אולטרסאונד התמונה בולטת. אם יש קשר משולש ולא כפול, וכתוצאה מכך אות צבע משולש, האבחנה נחשבת מאושרת.
סיכונים, תופעות לוואי וסכנות
שלא כמו PCR, למשל, הכלאה באתרו חשופה פחות לזיהום. בנוסף, הזמן הנדרש להליך הוא קטן מאוד. עם זאת, מכיוון שעוברים במיוחד יוצרים דפוסים כרומוזומליים, לא ניתן להשתמש בכל דפוס קיים כדי להסיק בוודאות את שאר הכרומוזומלים. הפצה וכך המצב הגנטי של תאים אחרים. אותות צבע עשויים גם להיות חופפים או להישאר בלתי נראים מסיבות אחרות. לפיכך, הכלאה באתרו ככלי אבחוני במהלך הֵרָיוֹן נוטה יחסית לטעויות. אבחנות מוטעות יכולות להתרחש והורים עשויים להחליט נגד בריא עובר. כדי להפחית את נטיית השגיאות של הכלאה באתרו, יש לבחון לפחות שני תאים עובריים בו זמנית. על ידי בחינת שני תאים במקביל, קיים כיום רק סיכון זניח לאבחון מוטעה. לכן הורים יכולים להסתמך על האבחנה במקרה כזה. הכלאה באתרו אינה מוצעת לכל אישה בהריון, אלא רק לנשים מקבוצת סיכון. עם זאת, נשים בהריון אינן נשללות מאבחון מסוג זה לבקשתן. לֹא נוֹרמָלִי אולטרסאונד ממצאים או סרום לא תקין עשויים לגרום לרופא להציע את הליך האבחון. כיום ניתן להשתמש בהכלאה באתרו לאבחון חלק גדול מהסטיות הכרומוזומליות, אך בשום אופן לא בכולן. לכן, אין לבצע הכלאה באתרם לבד, אך יש להשתמש בה תמיד בשילוב עם בדיקת כרומוזום קונבנציונאלית. הטיפול באישה ההרה ממלא תפקיד מרכזי בהליך זה. לכן, לפני הניתוח, מתקיים דיון מעמיק על שיטת האבחון עם האם הצפויה, המודיע לה על הסיכונים, האפשרויות ומגבלות הטכניקה.
