בדיקת ELISA הינה בדיקה רפואית במעבדה, שבמהלכה מתרחשת מה שנקרא תגובה אנטיגן-נוגדן. ניתן לבדוק אנטיגנים שונים הממלאים תפקיד ברפואה אנושית או וטרינרית. רק מכוני מעבדה מוסמכים מוזמנים לבצע את הבדיקה בגרמניה.
מהו נוהל?
בבדיקות רפואיות במעבדה, בדיקת ELISA שייכת להליך החיסוני כביכול. באמצעות הליך הבדיקה, חלבון מולקולות ניתן לזהות בצורה שונה לגמרי נוזלי גוף. ELISA הוא קיצור של Assy Enzym Linked Immuno Sorbent Assay. לפיכך זהו ייעוד בשפה האנגלית שהתבסס על השימוש הרפואי הגרמני. בדיקת ELISA שייכת למה שמכונה פרוצדורות אימונולוגיות בבדיקות רפואיות במעבדה. ניתן להשתמש בהליך הבדיקה לאיתור חלבונים מולקולות במגוון רחב של נוזלי גוף. גילוי אלה מולקולות בתורו מאפשרים להסיק מסקנות לגבי מחלות או תמונות קליניות מסוימות, ולכן הרופאים גם תלויים את האבחנה שלהם בתוצאה של בדיקת ELISA שכזו. לפיכך להליך הבדיקה יש חשיבות רבה בפרקטיקה הקלינית היומיומית, בין אם במסגרת אשפוז או אשפוז. המקביל נוזלי גוף, למשל שלם דם או נוזלים מ המפרקים, נשלחים למעבדה מיד לאחר איסוףם מהמטופל. בדרך כלל מדובר בדוגמאות דחופות למדי, מכיוון שהחומר המקורי נחשב לרגיש ויש לבחון אותו במהירות האפשרית. מה שמכונה דגימות מאוחסנות מדי יכולות עוֹפֶרֶת לתוצאות שליליות כוזבות משום שהפתולוגי חלבונים לזיהוי צומצמו או הושפלו בינתיים. לפיכך, מה שמכונה פרה-אנליטיקה ממלא תפקיד חשוב ב- ELISA; יש לחזור על תוצאות חשודות או שליליות אם קיימים תסמינים קליניים מתאימים.
פונקציה, אפקט ומטרות
לביצוע נכון של בדיקות במעבדה רפואית מוסמכת, מבחנות וצלחות מיקרו-טיטר כביכול נחוצים בהחלט. צלחות אלה עם כיפות דקיקות למחצה עשויות פלסטיק מיוחד ומצופות כל אחת בנוגדן מאוד ספציפי. אם האנטיגן שיש לאתר קיים בנוזל הגוף שיש לבחון, אזי תגובה אנטיגן-נוגדן ספציפית מתרחשת על פי מה שנקרא עקרון הנעילה והמפתח. ניתן להכניס את חומר הדגימה לצלחות באופן ידני על ידי אנשי מעבדה באמצעות פיפטות או באופן אוטומטי לחלוטין. במכונים רפואיים מעבדתיים מודרניים משתמשים רק במערכות אוטומטיות לחלוטין לצורך אבחון ELISA. עם זאת, אלה חייבים להיות במעקב על ידי צוות מיומן, עוזרי מעבדה רפואית-טכנית. מה שמכונה בקרת איכות פנימית וחיצונית היא גם באחריות צוות המעבדה, העולה על הצוות הרפואי לרפואת מעבדה, מחלה מדבקת אפידמיולוגיה ומיקרוביולוגיה. לאחר אצווה הבדיקה הראשונה, כלומר לאחר פיפטה של החומר על הצלחות, האנטיגנים הספציפיים במדגם, אם קיימים, כבר נקשרו ל נוגדנים על צלחת הפלסטיק. לאחר מכן מבצעים שטיפה עם מלוחים פיזיולוגיים כדי להסיר גורמים המפריעים כגון אנטיגנים לא רצויים או חלבונים מההכנה. שלב זה חשוב מאוד כדי למנוע תגובות חיוביות כוזבות. תוצאה חיובית כוזבת שמתפרשת על ידי המעבדה עשויה להיות השלכות קטלניות על המטופל. בשלב השני של הבדיקה, נוסף נוגדן נוסף שמצמידים לאנזים. הנוגדן המסומן הזה נקשר גם לאנטיגן. בשלב שלישי ואחרון, מוסיפים צבע מיוחד בכמות מוגדרת, המושפלת במידה פחות או יותר על ידי שאריות אנזים שעדיין קיימות. רק אנזים כזה יכול להתפרק, שלא היה קשור בעבר לאנטיגן יחד עם הנוגדן. האנזים החופשי מסוגל לנתק את הצבע הנוסף. ניתן לקבוע במדויק את הכמות המדויקת של הצבע השסוע בשיטת מעבדה אחרת, מה שמכונה פוטומטריה. זה מאפשר להסיק מסקנות מדויקות בשאלה האם אנטיגן קיים בכלל בחומר מדגם, ואם כן, כמה. בדיקת ELISA משמשת לא רק לאבחון הראשוני או לאישור אבחנות החשודות של מחלות ותמונות קליניות מסוימות, אלא גם כדי לעקוב אחר התקדמותם. אם האנטיגן ריכוז במבחן הופך נמוך יותר במהלך תרפיה, הטיפול נחשב למוצלח.
סיכונים, תופעות לוואי וסכנות
בדיקת ELISA משיגה את ערכה האינפורמטיבי בעיקר באמצעות איתור מבנים אנטיגניים בנוזלי הגוף. הבדיקה מאפשרת מה שמכונה הצהרה איכותית, אך גם כמותית וחצי כמותית אודות הימצאותם החשודה של אנטיגנים מסוימים בנוזלי הגוף. כֹּל דם לא ניתן להשתמש בבדיקה, רק בסרום הדם. בדיקה ישירה על המטופל, למשל מה- נימים דם של קְצֵה אֶצבָּעוֹת, ולכן, כמו בכמה בדיקות סרולוגיות אחרות, לא ניתן עד כה. ברפואה אנושית, בדיקת ELISA משמשת בעיקר לאיתור אנטיגנים בזיהומים חיידקיים, נגיפיים או פטרייתיים. בנוסף, כל התוצאות החיוביות של צהבת סרולוגיה נבדקת שוב עם בדיקת ELISA כסטנדרט. מסוים הורמונים, למשל ה- הֵרָיוֹן הורמון HCG, ניתן לקבוע גם באמצעות בדיקת ELISA. אם מתרחשים סיבוכים מסוימים במהלך הֵרָיוֹן, ידע מדויק של ריכוז של הורמון ההריון בדם עוזר מאוד באבחון ובטיפול. אינדיקציה נוספת לבדיקה היא איתור של מה שמכונה פרפרוטאינים בשתן, כפי שהם מופיעים, למשל, אצל שונים מחלות גידולים, כגון מיאלומה נפוצה. בדיקת ELISA מבוצעת עד היום במעבדות רבות כיום, אך נחשבת מיושנת על ידי מומחים. התגובה החיסונית יחד עם אנזימים במבחן ELISA הוחלף יותר ויותר בשנים האחרונות בתוויות רדיואקטיביות נוגדנים, המספקים תוצאת מדידה כמותית טובה עוד יותר. בדיקות אלה נקראות גם RIA, רדיו Immunabsorbent Assay. התקדמות ספציפית נוספת של ELISA הן שיטות כימיות קלות כגון הארה או פלואורסצנטי.
