ניתוח מקטעים קפואים
זה הכרחי אם המנתח זקוק למידע אודות הרקמה שהוסרה במהלך ניתוח על מנת להחליט על מהלך ההליך. לדוגמה, גידול ממאיר קטן מוסר מה- כליה. כעת נדרש חתך מהיר כדי לראות האם הגידול הוסר לחלוטין או שיש עדיין כמויות אדירות של רקמות ממאירות בשולי דגימות הרקמה.
בסופו של דבר, תוצאות בדיקת החלק הקפוא קובעות את מהלך הניתוח ואת תוכנית הטיפול הנוספת של המטופל. כיצד עובדת בדיקת קטע קפואה? תוך 10 דקות הרקמה מיוצבת על ידי הקפאה ב -20 מעלות צלזיוס, ואז נעשה חתך בעובי של 5 - 10 מיקרומטר על המיקרוטום שנקרא. זה ממוקם על שקופית, צלחת זכוכית קטנה, מוכתם במהירות. בסוף, הממצאים נבחנים במיקרוסקופ וניתן להעביר את התוצאה באופן מיידי לחדר הניתוח.
שיטות מכתים
שיטות מכתים היסטולוגיות רבות התפתחו במהלך 120 השנים האחרונות. מבני התאים והרקמות מחולקים לתאים בזופיליים, אסידופיליים ונויטרופילים בהתבסס על תגובת הצבע עם חומרי הצביעה. יתר על כן, ישנם גם מבנים אגרופיליים ונוקלאופיליים.
בזופילי מכתים את כל מה שמכיל קבוצת חומצה ומוכתם בצבע בסיסי (למשל המטוקסילין או כחול מתילן). מבנים חומצופיליים הם בסיסיים ולכן ניתן להכתים אותם בשחיקה או בפוקסין חומצי (צבעי חומצה). אלה כוללים את הציטופלזמה ו קולגן סיבים.
רכיבים נויטרופיליים או ליפופיליים אינם יכולים להגיב לא בצבע חומצי או בסיסי ולכן לא ניתן להכתים אותם. רכיבים אגרופיליים יכולים לקשור יוני כסף ולהמיר אותם לכסף אלמנטרי. תגובת צבע נוקלאופילית (גרעין = גרעין תא, אוהב גרעין תאים) נובעת מצבעים נוקלאופיליים ב גרעין התא.אלה קשורים ל- DNA או חומרים בסיסיים הנקשרים לחומצות גרעין.
כיום, הושלמו שיטות הצביעה הכימית בשיטות אימונולוגיות. תגובת האנטיגן-נוגדן משמשת בטכניקה זו לאיתור מאפייני תאים מסוימים. לאחר מכן ניתן להראות את התגובה באמצעות טכניקה מתוחכמת.
שיטות מכתים נפוצות הן: צביעת HE = צביעת המטוקסילין-אאוזין: המטוקסילין, צבע טבעי, מכתים את כל המבנים כחולים, שהם בזופיליים (= אוהבי בסיס) ולכן חומציים, כגון DNA, גרעיני תאים, ריבוזומיםוכו 'אאוזין, לעומת זאת, מיוצר באופן סינטטי. אאוזין מכתים את כל מבני התאים באדום אם הם חומצופיליים (= אוהבי חומצה) או בסיסיים.
אל האני חלבונים של הציטופלזמה, המיטוכונדריה, ו קולגן הם ביניהם. מכתים אזן: הוא מורכב מאותיות הראשונות משני הצבעים, אזוקארמין G וכתום כחול-זהב אנילין: כתמים אלה גרעין התא וסיבי שריר אדומים והציטופלזמה אדמדמה. קולגן וסיבי הרשתית הופכים לכחולים בכתים זה.
כתם Giemsa (תכלת-אאוזין-מתילן כחול של Giemsa) משמש לכתם דם מריחות תאים. ניתן לזהות בקלות גרעיני תאים על ידי תגובת הצבע הסגול. הציטופלזמה מכתמת כחלחל.
בכתמי האלסטיקה (רסורצינול-פוקסין-אורצ'ין), כל הסיבים האלסטיים מוצגים בצבע שחור-סגול. שיטת הצביעה של ואן גיזון מאופיינת בכך שצביעה מבוצעת לראשונה עם המטוקסילין. אז משתמשים בפוקסין של חומצה פיקרית (מיקרו פוקסין) או חומצה פיקרית תיאזין.
בסופו של דבר גרעיני התאים נראים שחומים-כהים, הציטופלזמה נראית חומה בהירה למדי. כתמים נגדיים עם חומצה פיקרית תיאזין מכתים את הסיבים האלסטיים ורקמת השריר בצבע כתום-צהוב וסיבי הקולגן אדומים. בצביעת טריכרום על פי מאסון-גולדנר, גודל מולקולת הצבע הוא הגורם החשוב ביותר בשיטת הצביעה.
נעשה שימוש בהמטוקסילין מברזל, בדרך כלל עם שלושה צבעים נוספים, כלומר שועל חומצה, G כתום וירוק בהיר. זה מכתים קולגן רקמת חיבור וירוק ריר, גרעיני תאים כחולים-שחורים, ציטופלזמה אדומים, שרירים אדומים ואדומים דם תאים (אריתרוציטים) כתום אדום. בנוסף, יש מכתים גרם, המשמש להבדיל בקטריה.
גרם חיובי בקטריה מוכתמים כחול וחיידקים שליליים הם מוכתמים באדום. מכתים Ziehl-Neelsen משמש גם בקטריהכלומר אלה שעמידים בפני חומצה, למשל, מראים שחפת פתוגנים באדום. שיטות צביעה נוספות שכדאי להזכיר כאן הן התגובה הברלינית-כחולה, האחראית לגילוי יוני ברזל משולשים בקטעי רקמה, ושיטת צביעת המטוקסילין בברזל על פי היידנהיין.
