אימונואלקטרופורזה משמש לזיהוי אבחון מעבדתי של חד שבטי נוגדנים אצל המטופל דם. חד שבטי נוגדנים נגזרים מאותו תא ומופנים כנגד אותם אנטיגנים. מסיבה זו, הם נחשבים לפתולוגיים וכאשר הם מתגלים מרמזים על מחלות כמו מחלת וולדנסטרום.
מהי אימונואלקטרופורזה?
אימונואלקטרופורזה משמש לזיהוי אבחון מעבדתי של חד שבטי נוגדנים אצל המטופל דם. ליונים יש ניידות דיפרנציאלית. ניידות דיפרנציאלית זו מהווה בסיס לשיטות אלקטרופרזיות. שיטות אלה מפרידות חומרים שונים זה מזה באמצעות שדות חשמליים וכוח המשיכה. אחת השיטות הידועות מהשטח היא אימונואלקטרופרזיס. זהו הליך אבחון איכותי המשמש לאיתור נוגדנים מונוקלוניים. נוגדנים הם חומרי חלבון פעילים באופן אימונולוגי של קו תאים ספציפי. נוגדנים מונוקלוניים כולם מקורם באותו לימפוציט B ומכוונים בהתאם לאפיטופ יחיד. כל תגובה חיסונית טבעית כנגד אנטיגנים פולשים תואמת לתגובה רב-כיוונית ולכן מכוונת כנגד אפיטופים שונים. תגובה חיסונית חד שבטית מספקת אפוא עדויות לתהליכי גוף פתולוגיים. נוגדנים מונוקלוניים לאגד שונה מולקולות עם ספציפיות גבוהה. ניתן לזהות קישור זה על ידי חיסון אלקטרופורזה. השיטה היא הליך אבחון מעבדה איכותי והיא מורכבת משני סוגי ההליכים, אלקטרופורזה בסרום ודיפוזיה חיסונית.
פונקציה, השפעה ויעדים
אימונואלקטרופורזה משלבת את המתודולוגיה של אלקטרופורזה בסרום עם דיפוזיה חיסונית. הסרום של המטופל מונח על ג'ל אגרוזה או סרט אצטט תאית. מוחל גם סרום בקרה. אחרי היישום מתבצעת הפרדה אלקטרופורטית של הדגימות. אנטיסרה, IgG, IgA, IgM, חומצה אצטית עבור אלקטרופורזה וקאפה רגילים, ולמבדה מוחלים בין קווי ההפרדה. זה מגדיר תגובה עם הנוגדנים של סרום המטופל, שיוצר קווי משקעים. תלוי באנטי-סרום בו נעשה שימוש ובמיקום וצורת הקווים האישיים, ניתן להסיק מסקנות לגבי אימונוגלובולינים עם שרשרות קלות של קאפה או למבדה. במקרה של רצועת למבדה, קיימות שרשראות אור חופשיות של נוגדנים. באמצעות IgE ו- IgD הנדירים, המעבדה מספקת ראיות נוספות המאפשרות קביעה מדויקת של ה- אימונוגלובולינים. הליך של אלקטרופורזה דיפוזיה חיסונית מתרחש על פי פייר גראבר וקרטיס וויליאמס ומתאים לשילוב של אלקטרופורזה ג'ל אגרוזה של חלבונים וכן דיפוזיה של נוגדנים. ראשית, מתרחשת אלקטרופורזה ג'ל אגרוזה. לאחר מכן, הנוגדנים הכלולים מתפזרים כנגד להקות האנטיגנים ובכך מולידים קשתות משקעים. יש להבדיל את זה מאימונואלקטרוזה רוקט של לורל, התואמת לאלקטרופורזה של חלבונים בתוך ג'ל agarose, שכל אחד מהם מכיל נוגדנים באופן ספציפי ריכוז. הג'ל מכיל חיץ בסיסי מעט המאפשר לנדיד רק לאנטיגנים, ודוחף את מרבית הנוגדנים לנקודה האיזואלקטרית על ידי חשיפה ל- pH הבסיסי מעט עד שהם מפסיקים לנוע אלקטרופורטית. בתחילת אימונואלקטורזה של רוקט, יש עודף של אנטיגן, ולכן נוצרים מתחמי אנטיגן-נוגדנים מסיסים. במהלך אלקטרופורזה מתרחשת קשירה נוספת בין אנטיגנים לנוגדנים נוספים. בנקודת השוויון נוצרים בדרך זו אימונופרוטים, הדומים לדמויות דמויי טילים עם גובה פרופורציונלי לאנטיגן. ריכוז. גובה המשקע נמדד כדי להעריך את הבדיקה.
סיכונים, תופעות לוואי וסכנות
איתור נוגדנים חד שבטיים חשוב במיוחד לאבחון מיאלומה נפוצה ומחלת וולדנסטרום. הגילוי המתקבל מעיד על ניוון ממאיר של תאי החיסון. מיאלומה נפוצה תואמת ל- a סרטן של מח עצם מאופיין בריבוי ממאיר של תאים המייצרים נוגדנים בפלסמה. תאי פלזמה אלה מייצרים נוגדנים ושבריהם. תאי פלזמה ממאירים מקורם תמיד בתא קדמון משותף ולכן הם זהים גנטית. הם מייצרים נוגדנים חד שבטיים באופן בלעדי. הממאירות של מחלה זו עשויה להתאים לשלב טרום סרטני, אך עשויה להגיע גם לשלב ממאיר ביותר הקטלני במהירות ללא טיפול. תסמיני מחלה נובעים מגידול ממאיר של התאים או מהנוגדנים ושברי הנוגדנים. התסמינים השכיחים ביותר כוללים כאב עצם, פירוק עצם ושברים בעצמות ספונטניים. סִידָן רמות ב דם לעיתים קרובות מוגבהים. בנוסף, לעתים קרובות הנוגדנים הלא תקינים שוכבים ברקמות וגורמים לתפקוד לקוי של איברים, דבר שיכול עוֹפֶרֶת לביטויים כגון כליה כישלון או פגיעה בזרימת הדם. מחלת וולדסטרום היא גם מחלת גידול ממאירה. באופן ספציפי יותר, זה ממאיר לימפומה מחלה המסווגת כתאי B מתקדמת אט אט וכמעט ללא תסמיניםלימפומה ע"ש הודג'קין. ברוב המקרים ניתן לאתר ייצור חריג של IgM חד שבטי במחלה, אשר נובע מפעילות של ממאיר. לימפומה תאים. מחלת וולדנסטרום דומה מאוד למיאלומה נפוצה במאפייניה, אך בדרך כלל מראה מהלך חיובי יותר. מרבית החולים במחלת וולדנסטרום הם במידה רבה ללא תסמינים עד לאבחון. חולים אחרים מראים תסמינים מוקדמים כגון לא ספציפיים עייפות או נוירופתיה היקפית הנובעת מתצהיר של IgM חד שבטי בתוך נדן המיאלין. אפילו כמויות קטנות של IgM יכולות לגרום פולינופורופתיה. בחולים אחרים, פולינופורופתיה אינו מתרחש אפילו ברמות גבוהות. בנוסף, תסמינים לא ספציפיים כגון חום, ירידה לא רצויה במשקל, או הזעות לילה עלולות להופיע. כאבי עצמות הוא גם אופייני. עקב ייצור יתר של IgM, הדם הופך להיות צמיג יתר על המידה, כך שהתסמינים הנ"ל עשויים להיות קשורים לאלה של תסמונת היפר-צמיגות. זֶה נטיית דימום מתבטא ברוב המקרים בתדירות גבוהה דימום מהאף, כאבי ראש, תחושה כללית של חולשה או ראייה מטושטשת ותלונות אקוסטיות. כדי לזהות ממאירות מסוג זה, אימונואלקטרופרזיס הפכה זה מכבר להליך אבחוני סטנדרטי.
